HPLC(High Performance Liquid Chromatography):液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
UPLC(Ultra Performance Liquid Chromatography):色谱理论认为提高色谱柱的效能(efficiency)就能增加仪器的解析度(resolution),而运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法。但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能一直的色谱仪器科学的瓶颈,因为小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力(比如9000psi),需要更小的系统体积(死体积),并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器。UPLC具有超低扩散体积(小于15μL)可尽可能发挥亚2μm色谱柱性能。色谱工作者使用UPLC结合小颗粒色谱柱可以获得更好的分离度,灵敏度,更快的分析速度。
UHPLC: (Ultra-High Performance Liquid Chromatography):UHPLC的诞生是UPLC 对色谱分离技术带来的一系列变化之一。UHPLC在制造技术,扩散体积和耐受压力方面进行了优化,使之能够匹配2.5~3.5μm颗粒度的柱子,大限度发挥色谱性能。采用颗粒更小的固相不仅可以实现更高的分辨率,同时还能缩短整体分析时间。
三者的区别在于:
| HPLC | UHPLC | UPLC |
扩散体积 | >30μL | 15 - 30 µL | < 15 µL |
色谱柱 | 3.0-4.6 mm内径3-10 µm颗粒选择代表:4.6mm内径, 5µm | 2.1-4.6 mm内径1.7-5 µm颗粒选择代表:3.0 mm内径,2-3.5μm 实心核颗粒色谱柱 | 1.0-4.6 mm内径1.6-5 µm颗粒选择代表:2.1 mm内径,亚2μm |
高耐压 | <6,000 PSI | ≥9,000 PSI | ≥15,000 PSI |