关于高效液相色谱仪在操作时遇到的技术问题解答

1、高效液相色谱仪是如何实现高效、快速、灵敏这些特点的?

解：气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创造条件，从它的高效、高速和高灵敏渡得到启发，采用5一10四微粒出定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相的流速;设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，克服经典液相色谱曲缺点，从而达到高效、快速、灵敏。

 

2、简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何减少谙带扩张、提高柱效?

解：液相色谱中引起色诺峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。

在液相色谱中要减小谱带扩张，提高柱效，要减少续料颗粒直径，减小境料孔穴深度，提高装填的均匀性，采用低粘度溶剂作流动相，流速尽可能低，同时要尽可能采用死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。

 

3、为什么要提出折合参数?有何特点?　　

解：我们知道色谱操作条件对板高是有影响的.Giddings发现，固定相相同，填充良好，共是粒度dp不同，因而H-u曲线不同，在液相色谱中，培板高度是粒度的函数，为了比较不向色谱条件下的板**.提出折合参数，包括折合板高、折合流速、折合柱长。其特点是对于不同粒度的填料能得到相同的H—ur 曲线，因此可以在相同的条件下比较不同填料的柱效。

 

4、高效液相色谱柱有哪几种类型? 细径柱有什么优点?

解：高效液相色谱拄大致可分为三种类型：内径小于2mm的称为细管径或微管径柱;内径在2~5mm范围内的是常规高效液相色谱柱;内径大于5mm的一般称为半制备柱或制备柱。细管径柱的主要优点是：（1）分离效能高。（2）流动相*佳流速低，消耗量少。（3）可采用多种检测器，便于联用（CLC MS，CLC-FTIR）。（4）采用细而短的毛细管柱可以提高分析速度，实现快速分析。

 

5、对液相色谱流动相有何要求?

解：用作液相色谱流动相的溶剂，其纯度和化学特性必须满足色谱过程中稳定性和重复性的要求。对样品要有一定的溶解能力，粘度小，化学稳定性好，避免发生不可逆的化学吸附。溶剂应与检测器相匹配，不干涉所使用检测器的工作，制备色谱的溶剂应不干扰对分离各组分的回收。除此以外，选择的溶剂对所给定的样品组分具有合适的极性和良好的选择性。

等等等等